Pengertian :
adalah tata cara laboratorium untuk mengindentifikasi kuman melalui
pengecatan Gram.
Tujuan :
Diagnosis
Sampel
: Swab, pus, urine, darah faeces, liquor, pleura, ascites, sputum, dll
ciran darah.
-
Lampu spiritus
-
Pipet Pasteur
-
Obyek Glass
-
Jembatan pengecatan
-
Mikroskop
Reagen :
1. Larutan Gram A (Carbol Gentian Violet) :
a. Gentian Violet 1
gr
b. Alkohol 96% 10
ml
c. Phenol Kristal 1
gr
d. Aquadest
90 ml
2. Larutan Gram B (lugol)
a. Yodium 1
gr
b. Kalium
Yodida 2 gr
c. Aquadest
300 ml
3. Larutan gram C (Alkohol 96%)
4. Larutan Gram D ( Solution fuchsin 1%)
a. Basic
Fuchsin 1 gr
b. Aquadest
100 ml
Cara kerja :
a. Mempersiapkan alat-alat yang akan diperlukan
b. Mempersiakan reagensia yang diperlukan
c. Membuat preparat / sediaaan
d. Mengeringkan dan memfiksasi preparat diatas nyla api
spiritus
e. Melakukan pengecatan :
1. Meletakan preparat diatas jembatan pengecatan
2. Menuanggi preparat dengan larutan Gram A selama 4
menit
3. Mencuci preparat dengan air mengalir sebentar lalu
menuangginya dengan larutan Gram b selama 1 menit
4. Mencuci preparat deangan air mengalir sebentar lalu
menuanginya dengan larutan Gram C goyang-goyang
5. Mencuci preparat deangan air mengalir sebentar lalu
menuanginya dengan larutan Gram D selama 5 menit
6. Mencuci preparat deangan air mengalir lalu
membiarkan mongering di udara ( kering angin)
f. Mengamati
preparat dibawah mikroskop
dengan perbesaran kuat untuk mencari adanya bakteri gram ( + ) dan Gram (
- ).
gb. pengecatan gram (+)
2. Pengecatan BTA
Pengertian : Cara mengidentifikasi Bakteri Tahan Asam
melalui pengecatan menurut Ziehl Nielsen
Tujuan : Diagnosis
Sampel : sputum, lesi, Swab, pus, urine, darah,
faeces, liquor, pleura, ascites
Alat :
- Spirtus
- Obyek glass
- Jembatan pengecatan
- Ose dan mikroskop
- Pipet pasteur
Reagen :
1. Carbol fuchsin
- Basic
fuchsin 3,0 gr
- Etanol/methanol 100 ml
- Kristal
phenol 45 gr
- Aquadest 900 ml
2. larutan
dekolorisasi :
-
Hcl pekat 30
ml
-
Etanol 970
ml
3.
pewarna kontras :
- Methylen blue
khlorida 30 ml
-
Air suling/aquadest 1000 ml
Cara kerja :
a. Mempersiapkan alat-alatnyang di perlukan
b. Mempersiapkan reagensia
c. Membuat preparat/sediaan dari bagian
spesimen yang purulen/berdarah, menghapus spesimen pada bagian tengah
obyek glass ukuran 2 x 3 cm,
menulis nomor urut sesuai register Lab TB 04 di sebelah pinggir obyek
glass
d. Membakar ose sampai membara setelah setiap
mengerjakan 1 spesimen
e. Mengeringkan dan memfiksasi preparat di
atas nyala api lampu spirtus
f. Melakukan pengecatan :
1. Meletakkan preparat diatas jembatan
pengecatan
2. Menuangi preparat dengan carbol fuchsin
3. Memanaskan dari bawah setiap sediaan dengan
lampu spirtus sampai keluar uap, api harus selalu di gerakkan,
dihentikan bila sudah timbul uap
4. Mendinginkan selama 5 menit atau lebih,
jangan sampai pewarna kering
5. Mencuci dengan air mengalir, memiringkan
setiap sediaan untuk mengalirkn air yang berlebih
6. Mencuci sediaan dengan decolorasi sampai
tidak ada pewarna carbol fuchsin, maksimal 3 menit
7. Mencuci dengan air mengalir
8. Menggenangi tiap sediaan dengan pewarna
kontras 30 menit
9. Mencuci lagi setiap sediaan dengan air
mengalir, memiringkan sediaan untuk mengurangi air yang berlebih,
mengeringkan di udara terbuka.
10. Mengamati preparat di bawah mikroskop
dengan pembesaran kuat (100x) untuk mencari adanya bakteri tahan asam
(BTA)
gb. pengecatan BTA (+)
0 komentar:
Posting Komentar